全球装备网：如何选择液相色谱仪保护柱，你了解吗？

　　全球装备网：我们在之前的文章里面已经对液相色谱做过相应的阐述，不知道大家有没有了解过呢？当然液相色谱是需要保护的，所以液相色谱保护柱应该怎么选择，小编自然也是要告诉您的，选择怎样的保护柱才是对您的液相色谱仪有利的呢？

　　液相色谱仪

　　污染来源

　　来自于色谱系统的污染主要指，HPLC仪器系统中部件磨损而产生的固体颗粒，以及流动相系统过滤不合理残留的固体颗粒。

　　来自于样品的污染主要指，未合理溶解的样品或者已合理溶解的样品进入色谱系统中，由于样品溶剂和流动相溶剂对样品溶解存在的溶解度差异，导致沉淀析出污染系统。特别是对于中药、自然产物、合成中间体及生物药品的检测，因基质的复杂性，色谱柱受污染的情况会更加严重。

　　会导致色谱系统压力升高、色谱柱塌陷、填料变色等，从而带来检测成本高，测试结果不准确等各种影响。

　　保护柱的作用

　　保护柱是液相色谱分析中重要的色谱耗材，使用保护柱可大大降低分析柱受污染的程度，延长分析柱使用寿命。

　　保护柱位于进样器与分析柱之间，作用主要两方面：

　　1.截留不溶性颗粒。

　　2.吸附样品基质中的杂质。

　　以下几种情况建议使用保护柱：

　　1.中药、自然产物及合成中间体等基质较复杂的样品分析——因溶解性差异导致样品析出而污染分析柱的情况比较严重，梯度洗脱时影响更大。

　　2.生物样品分析——因样品的不可逆吸附导致的污染，保护柱可先于分析柱承受这种污染，从而延长分析柱寿命。

　　保护柱很重要，但选择合适的保护柱更重要，选择或使用不当也可能带来截然相反的效果。

　　保护柱分类及选择

　　从材质上分：不锈钢材质和PEEK（聚醚醚酮）材质

　　PEEK材质优缺点——样品对金属离子比较敏感时，选择PEEK材质比较合适，比如某些蛋白分析会用到PEEK材质的分析柱，主要就是考虑到这方面的因素；

　　不锈钢材质优缺点——大部分小分子化合物的分析，选择不锈钢材质保护柱居多，特别是当流动相体系使用到四氢呋喃（THF）或DMSO等一些溶解性较强的溶剂时，选择不锈钢材质，甚至对于HPLC系统的管路也需要替换成不锈钢材质，因THF对于PEEK管路有相当强的腐蚀作用。

　　从结构上分：卡套式（柱芯+柱套）和直接填装短柱

　　直接填装短柱优缺点——这种结构的保护柱实质就是短的色谱柱，一般填装的填料跟分析柱填料合理一样。生物样品分析中，用这种类型保护柱居多，除可过滤一些不溶颗粒外，还可除去一些在分析柱上易吸附的杂质。缺点是，一次性使用，污染严重时，只能报废。

　　卡套式保护柱优缺点——卡套式保护柱的柱套可反复使用，柱芯污染后可替换，厂家会提供配套的保护柱芯，但购买时需要注意，柱芯中有与分析柱匹配的填料，需要确认柱芯中的填料类型再购买。同时，柱芯和柱套需是来源于同一厂家的同一规格，否则，会存在匹配上的差异，导致峰型异常或者漏液。

　　从连接方式上分：独立式和直连式

　　独立式保护柱优缺点——保护柱和分析柱之间用一段管路连接，不用担心与分析柱在连接上的匹配问题。但使用管路连接时，连接不当容易产生死体积。

　　直连式保护柱优缺点——保护柱接口带螺纹，可直接与分析柱连接，死体积小，UPLC分析时建议选择直连式保护柱；缺点：购买时需保证接口与分析柱匹配。

　　液相色谱仪保护住

　　保护柱选择考虑以下几方面因素：

　　1.除非特殊情况，一般选择填料基质与分析柱基质合理相同的保护柱。

　　2.选择保护柱尺寸可按柱体积计算，保护柱体积按分析柱体积的5%~10%即可；如4.6*250mm的分析柱体积约为4mL，保护柱体积可选择在0.2~0.4mL之间为宜。同时，保护柱内径应与分析柱内径相同或相当。

　　保护柱使用注意事项

　　1.独立式保护柱与分析柱连接时，连接管路尽可能短，且接口切面平滑，尽量减少死体积以降低柱外展宽效应。

　　2.卡套式保护柱一般未标注液流方向，使用时自行标注，并按照标注方向来使用，以免正反向使用后，截留的杂质污染分析柱。

　　3.直接填装的短柱型保护柱，出现柱压升高或峰型变差时，可不接分析柱进行反向清洗，清洗溶剂可参考分析柱清洗溶剂。

　　4.卡套式保护柱，柱芯替换时，注意柱芯与柱套是否存在方向上的匹配，同时不易旋拧过紧，以防滑丝。

　　5.保护柱或柱芯一般不建议清洗，因可能对填料表面修饰有影响。

　　6.如同一保护柱配不同的分析柱使用，每次使用前，保护柱需先清洗并用流动相平衡保护柱一段时间后，再接分析柱使用。

　　保护柱与柱前过滤器的区别和使用

　　使用保护柱的目的在于延长分析柱的使用寿命，当分析柱造价昂贵时，保护柱的价值尤其能体现，某些情况下，当使用的分析柱本身价格便宜，保护柱并非必选，推荐使用柱前过滤器更合适。

　　柱前过滤器与保护柱两者外形相似，差异主要在于：保护柱内芯装有填料，而柱前过滤器内芯是可更换的滤片（一般为带孔的不锈钢烧结板）。

　　因此，从结构可以推测使用上的差异：

　　柱前过滤器——通用性强，任何分析柱前都可使用，因其滤芯只起到过滤和截留杂质的作用，滤片污染后可清洗，反复使用。

　　保护柱——柱中填料除了起截留杂质的作用外，也可除去样品中易吸附的杂质，这一点对生物样品分析尤其重要。

　　看完了文章是不是收获多多呢？关于液相色谱仪的保护柱，您还有没有疑问呢？小编可是把知道的都告诉您了呢，如果您还想了解多一点的色谱仪知识，比方说液相色谱仪，气相色谱仪，色谱柱灯相关消息的话，小编建议您联系我们。

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